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盤，請在步驟5之后插入托盤。有關(guān)詳細(xì)信息，請參閱“抗體恢復(fù)”部分。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數(shù)量（對于MultiBlot為2.5毫升，對于迷你吸墨紙為5毫升，或10 mL用于Midi印跡）。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點固定器中，表面可能會變干。重要提示：請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在連續(xù)運行真空的情況下，添加30 mL洗滌緩沖液（MultiBlot為15毫升）。重復(fù)洗滌步驟3次以上（總共4次洗滌）。當(dāng)框架完全為空時，將TURN真空關(guān)閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗（對于多印跡，為2.5 mL，5毫升用于迷你印跡，或10毫升用于Midi印跡）。在室溫下孵育10分鐘，然后哪家WB實驗加速器是有正規(guī)授權(quán)的？上海MerckWB實驗加速器Merck儀器哪家優(yōu)惠

15分鐘。圖4.擴展孵化（過夜）：SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化（1小時）：，SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免寶山區(qū)Merck手持細(xì)胞計數(shù)器Merck儀器規(guī)格益啟生物公司帶您了解細(xì)胞分析儀詳情。

體回收率差。 印跡大會和總議定書 1.用支撐層（藍(lán)色邊緣）握住吸墨紙托并弄濕膜層（白色）在潤濕過程中溢出水提供的托盤。不要弄濕支撐層。放置濕的滾動板上的污點固定器。2.如果需要，將印跡預(yù)先在甲醇和水中浸濕，然后將其放置在印跡支架中心，蛋白質(zhì)面朝下。注意：印跡不得超過材料中指定的尺寸必填部分。3.輕輕滾動印跡以去除氣泡，然后稀釋印跡保持并滾動一次。4.打開吸墨紙固定框架，用力將吸墨紙固定在蛋白質(zhì)面朝上，然后將其放入框架中。一個缺口吸墨架可確保正確放置在框架中。注意：如果只在框架中運行一個MultiBlot，請放置孔空白卡在第二口井中。5.關(guān)閉并鎖定框架。加入30 mL封閉溶液（MultiBlot為15毫升）。向下按框架并轉(zhuǎn)動系統(tǒng)旋鈕施加真空。當(dāng)框架完全為空時，關(guān)閉真空。注意：如果使用抗體回收托

項卡（圖8）創(chuàng)建和啟動自定義協(xié)議。要手動控制流量，使用“手動模式”標(biāo)簽選擇所需的井，壓力，和溫度（如果使用加熱歧管）。有關(guān)自動化協(xié)議或每次融合的手冊，請參閱CellASICO《ONIX2微流體系統(tǒng)用戶指南》。注意：對于需要快速交換溶液的實驗，請執(zhí)行以下操作可以應(yīng)用以下技術(shù)：高壓（55.2kPa[8psi）下的流量對于初始過渡，然后將流量減小到標(biāo)準(zhǔn)壓力長期暴露于6.9-13.8kPa（1-2psi）。 軟件操作下圖顯示了使用ellAsICEONX2軟件進(jìn)行實驗的兩種模式，請參閱CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用戶有關(guān)軟件功能的詳細(xì)信息的指南。圖7.手動模式降低了ONIX2系統(tǒng)的迭代操作?？梢允謩釉O(shè)置操作參數(shù)，此模式a5o提供了選項運行簡短的自動印版設(shè)置序列，這些序列益啟生物的細(xì)胞計數(shù)器怎么樣？

潤濕印跡。，對于大多數(shù)應(yīng)用和大多數(shù)抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請勿使用濃度高于0. 5％的干奶，因為它可能會導(dǎo)致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請參閱表5了解兼容性和推薦濃度?！裨谙礈?，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布?！裼捎赟NAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中的免疫檢測時間很短，因此建議在開始操作之前應(yīng)準(zhǔn)備一抗和二抗稀釋液?！馦ultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL，Mini blot固定器為5 mL，10 mL用于Midi印跡固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot為15毫升），以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。Merck樣本制備儀上海授權(quán)代理商。寶山區(qū)Merck手持細(xì)胞計數(shù)器Merck儀器規(guī)格

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