分離純化多肽的常用方法 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質(zhì)的性質(zhì)決定。對蛋白質(zhì)、多肽提取分離常用的方法包括：鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質(zhì)進行分離純化，同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物質(zhì)分析中常用的手段，如層析、叫泳等。 核磁共振,基質(zhì)輔助激光解析/ 離子化-飛行時間質(zhì)譜, 電霧離子化質(zhì)譜,連續(xù)流快原子轟擊質(zhì)譜,質(zhì)譜分析除上述方法之外，氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場解析質(zhì)譜、IR、UV 光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標記法及免疫學(xué)方法等都已應(yīng)用于多肽類物質(zhì)的結(jié)果鑒定、分析檢測之中?？诒枚嚯姆蛛x填料哪家強
分離純化多肽的常用方法-反相高效液相色譜 結(jié)果與保留值之間的關(guān)系：利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結(jié)構(gòu)的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數(shù)，Wilce 等利用多線性回歸方法對2106 種肽的保留性質(zhì)與結(jié)構(gòu)進行分析，得出了不同氨基酸組成對保留系數(shù)影響的關(guān)系，其中極性氨基酸殘基在2～20 氨基酸組成的肽中，可減少在柱上的保留時間；在10～60 氨基酸組成的肽中，非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時間，而含5～25 個氨基酸的小肽中，非極性氨基酸增加可延長在柱上的保留時間。 同時有不少文獻報道了肽鏈長度、氨基酸組成、溫度等條件對保留情況的影響，并利用計算機處理分析得到每種多肽的分離提取的比較好條件。 肽圖分析（Peptide Mapping）：肽圖分析是根據(jù)蛋白質(zhì)、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點，使用專一性較強的蛋白水解酶[ 一般未肽鏈內(nèi)切酶（endopeptidase）]作用于特殊的肽鏈位點將多肽裂解成小片斷，通過一定的分離檢測手段形成特征性指紋圖譜，肽圖分析對多肽結(jié)構(gòu)研究合特性鑒別具有重要意義。 南京銷售多肽分離填料
分離純化多肽的常用方法-分子排阻色譜 SEC 是利用多肽分子大小、形狀差異來分離純化多肽物質(zhì)，特別對一些較大的聚集態(tài)的分子更為方便，如人重組生長（hgH）的分離，不同結(jié)構(gòu)、構(gòu)型的GH 在SEC 柱上分離行為完全不同，從而可分離不同構(gòu)型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體，利用SEC 研究修飾化的PEG 的分離方法，此PEC 具有半衰期長、作用強的特點。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。 分離純化多肽的常用方法--離子交換色譜 IEXC 可在中性條件下，利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽。其可分為陽離子柱與陰離子柱兩大類，還有一些新型樹脂，如大孔型樹脂、均孔型樹脂、離子交換纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質(zhì)的分離分析研究中，對多肽的性質(zhì)、洗脫劑、洗脫條件的研究較多，不同的多肽分離條件有所不同，特別是洗脫劑的離子強度、鹽濃度等對純化影響較大。Wu 等報道利用離子交換柱層析法，探討分離牛碳酸酐異構(gòu)體和牛血清白蛋白、雞血清白蛋白酶的提取條件，獲得了有價值的數(shù)據(jù)供今后此類物質(zhì)分離研究。
分離純化多肽的常用方法-疏水作用色譜 HIC 是利用多肽中含有疏水基因，可與固定相之間產(chǎn)生疏水作用而達到分離分析的目的，其比RP-GPLC 具有較少使多肽變性的特點。利用GIC 分離生產(chǎn)（GH）產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)與活性比EP-GPLC 分離的要穩(wěn)定，活性較穩(wěn)定。Geng 等利用HIC 柱的低變性特點，將大腸桿菌表達出的經(jīng)鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過HIC 柱純化、折疊出高生物活性的產(chǎn)品。不同人尿表皮生長因子（EGF）也利用HIC 純化到了，均具有良好的生物活性。HIC 可將未經(jīng)離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC 則不能達到這一要求。
分離純化多肽的常用方法-置換色譜 HPDC 是利用小分子置換劑來交換色譜柱上的樣品，從而達到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC 鑒定分離了低于總量1% 組分的活性人重組生長（rHG ）。在研究非毒**換劑時Jayarama 發(fā)現(xiàn)化葡萄糖（Detran Sulfate，DS）是對β 乳球蛋白A 和B 的良好置換劑，一般DS 的相對分子質(zhì)量為1×104 和4×104 **宜。研究表明置換劑的相對分子質(zhì)量越低，越易于與固定相結(jié)合，因此在分離相對分子質(zhì)量小的多肽時，需要更小的置換劑才能將其置換純化出來。多肽分離填料哪家專業(yè)
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分離純化多肽的常用方法-膜蛋白色譜 CMP+分離強蔬水性蛋白、多肽混合物的層析系統(tǒng)，一般有去垢劑（如SDS）溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白，并由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團（P-端），又具有陽離子鈣（C-端），與固定相結(jié)合主要決定于膜蛋白的大小、SDS 結(jié)合量有關(guān)。利用原子散射法研究cAMP的分離機制發(fā)現(xiàn)，樣品與SDS 結(jié)合后在離子交換柱上存在SDS 分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換，從而達到分級分離的目的?？诒枚嚯姆蛛x填料哪家強
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