整體化色譜柱填料技術(shù) 　　整體化色譜柱(monolithic column)也是近年液相色譜柱填料研究的另一個重要方向。整體柱，又稱為棒狀柱，是一種用有機或無機聚合方法在色譜柱內(nèi)進(jìn)行原位聚合的連續(xù)床固定相。與常規(guī)裝填的液相色譜柱相比，整體柱具有更好的多孔性和滲透性，可以使用高流速實現(xiàn)快速的傳質(zhì)分離。聚合物整體柱一般采用離子交換或親和色譜方式，用于生物大分子如蛋白、抗體、DNA 的超快速分析，這樣的色譜柱包括Bio-Monolith 離子交換柱和Protein A、Protein G 親和色譜柱，以及ThermoroSwift IEX 離子交換柱和ProSwift RP 柱。使用此類整體化色譜...

液相色譜填料技術(shù)進(jìn)展 　　2　液相色譜填料技術(shù)進(jìn)展 　　近年來，液相色譜填料技術(shù)的發(fā)展主要在于快速液相色譜分析、多種色譜固定相及各種分離模式的應(yīng)用。 　　2.1　基于亞2微米填料的高效液相色譜柱技術(shù) 　　范氏(Van Demeter)方程是一個描述線速度與塔板高度(柱效)關(guān)系的經(jīng)驗式。在范氏方程中，填料粒徑大小是影響塔板高度的變量之一(圖2)，因此，提高分離效能的有效方法之一是減小填粒粒徑。較小粒徑的填料有利于降低渦流擴散及改變傳質(zhì)路徑，不僅使柱效更高，而且即使在較高的線速度下，理論塔板高度也不會增大，使色譜柱的分離性能得以保持，并有效地縮短分析時間和減少溶劑消耗，更加綠色環(huán)保。200...

液相色譜填料技術(shù)進(jìn)展 正在得到更的應(yīng)用，例如，使用1.8 μm 的C18 色譜柱分析《中國藥典》2015 年版一部中的復(fù)方丹參滴丸指紋圖譜，其時間可以控制在10 min 以內(nèi)中國藥典對亞2 微米色譜柱技術(shù)革新和應(yīng)用給予高度的關(guān)注，適時地修訂了液相色譜法的相關(guān)內(nèi)容。中國藥典2015 年版四部通則0512 色譜法規(guī)定，若需使用小粒徑(約2μm)填充劑，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配;如有必要，色譜條件也應(yīng)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種項下規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。天津口碑好液相色譜填料整體化色譜柱填料技術(shù) 　　整體化色譜柱(monolithi...

表面多孔型填料技術(shù) 　　表面多孔型顆粒填料(superficially porous particles，SPPs)又稱核- 殼型填料(core shell particles)，商品化的產(chǎn)品有5μm的Poroshell 300 SB C18，該填料采用4.5 μm的硅膠實心內(nèi)核，外面包裹一層0.25μm的多孔層，平均孔徑為300 ，主要用于蛋白質(zhì)和單抗的快速分析。由于表面多孔型填料具有極窄的粒徑分布和擴散路徑，同時可以減小渦流擴散，縮短傳質(zhì)路徑和減弱傳質(zhì)阻力，即便使用較粗的填料顆粒也可獲得較高的柱效。目前，一般使用亞3μm 的表面多孔型填料(2.6~2.7 μm)，即可獲得亞2微米填料的柱效...

表面多孔型填料技術(shù) 　　表面多孔型顆粒填料(superficially porous particles，SPPs)又稱核- 殼型填料(core shell particles)，商品化的產(chǎn)品有5μm的Poroshell 300 SB C18，該填料采用4.5 μm的硅膠實心內(nèi)核，外面包裹一層0.25μm的多孔層，平均孔徑為300 ，主要用于蛋白質(zhì)和單抗的快速分析。由于表面多孔型填料具有極窄的粒徑分布和擴散路徑，同時可以減小渦流擴散，縮短傳質(zhì)路徑和減弱傳質(zhì)阻力，即便使用較粗的填料顆粒也可獲得較高的柱效。目前，一般使用亞3μm 的表面多孔型填料(2.6~2.7 μm)，即可獲得亞2微米填料的柱效...

多種分離模式的應(yīng)用 　　目前液相色譜中主要應(yīng)用的依然是反相色譜，不過隨著色譜技術(shù)的發(fā)展和分析要求的提高，其他一些分離模式正逐步得到更加的應(yīng)用，如親水作用色譜(HILIC)、超臨界流體色譜(supercritical　fluid chromatography，SFC)、臨界點色譜(liquid chromatography at critical condition，LCCC)和多維色譜技術(shù)等。 　　HILIC 是近年來逐漸被認(rèn)可的一種強極性化合物分離方法，它是基于極性化合物在色譜固定相表面水層和流動相之間進(jìn)行的親水分配作用達(dá)到保留的一種分離模式。在HILIC分離中，流動相中水的比例越小，則...

多種分離模式的應(yīng)用 　LCCC 法是根據(jù)聚合物的功能基團(tuán)、嵌段結(jié)構(gòu)的差異進(jìn)行聚合物分離的一種色譜技術(shù)。LCCC 法的原理是基于臨界點之上、臨界點之下以及臨界點附近的標(biāo)度理論。當(dāng)使用多孔填充材料作為固定相時，分子排阻色譜(size exclusion chromatography，SEC)和相互作用色譜(interaction chromatography，IC)的分離機制在分離聚合物時同時發(fā)生作用。在某個特殊色譜條件(固定相、流動相組成、溫度)下，存在2 種分離機制的臨界點，被稱為焓熵互補點或色譜臨界條件(critical conditions)或臨界吸附點(critical adsorpti...

表面多孔型填料技術(shù) 　　表面多孔型顆粒填料(superficially porous particles，SPPs)又稱核- 殼型填料(core shell particles)，商品化的產(chǎn)品有5μm的Poroshell 300 SB C18，該填料采用4.5 μm的硅膠實心內(nèi)核，外面包裹一層0.25μm的多孔層，平均孔徑為300 ，主要用于蛋白質(zhì)和單抗的快速分析。由于表面多孔型填料具有極窄的粒徑分布和擴散路徑，同時可以減小渦流擴散，縮短傳質(zhì)路徑和減弱傳質(zhì)阻力，即便使用較粗的填料顆粒也可獲得較高的柱效。目前，一般使用亞3μm 的表面多孔型填料(2.6~2.7 μm)，即可獲得亞2微米填料的柱效...

表面多孔型填料技術(shù) 　　表面多孔型顆粒填料(superficially porous particles，SPPs)又稱核- 殼型填料(core shell particles)，商品化的產(chǎn)品有5μm的Poroshell 300 SB C18，該填料采用4.5 μm的硅膠實心內(nèi)核，外面包裹一層0.25μm的多孔層，平均孔徑為300 ，主要用于蛋白質(zhì)和單抗的快速分析。由于表面多孔型填料具有極窄的粒徑分布和擴散路徑，同時可以減小渦流擴散，縮短傳質(zhì)路徑和減弱傳質(zhì)阻力，即便使用較粗的填料顆粒也可獲得較高的柱效。目前，一般使用亞3μm 的表面多孔型填料(2.6~2.7 μm)，即可獲得亞2微米填料的柱效...

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不同選擇性的色譜固定相 　　由于反相色譜分離基于多種作用力的結(jié)果，不同鍵合相或同一種鍵合相但不同的硅膠基質(zhì)、封端技術(shù)和鍵合技術(shù)，其疏水作用、空間位阻、氫鍵作用、靜電作用、π-π作用、偶極-偶極作用等能力不同，對化合物的分離能力不同，故而表現(xiàn)出不一樣的選擇性。比如，在碳鏈中嵌入極性的酰胺基團(tuán)，不僅能夠使鍵合相的水相兼容性增加，而且可以提高化合物與固定相之間的氫鍵作用能力，使之獲得與普通C18 填料不一樣的選擇性。這樣的色譜柱有ZORBAX Bonus RP 和Waters Symmetry shield 等。Huawei Gu等利用Bonus RP 色譜柱與其他常規(guī)碳鏈反相色譜柱選擇性的不同，...

液相色譜填料技術(shù)進(jìn)展 正在得到更的應(yīng)用，例如，使用1.8 μm 的C18 色譜柱分析《中國藥典》2015 年版一部中的復(fù)方丹參滴丸指紋圖譜，其時間可以控制在10 min 以內(nèi)中國藥典對亞2 微米色譜柱技術(shù)革新和應(yīng)用給予高度的關(guān)注，適時地修訂了液相色譜法的相關(guān)內(nèi)容。中國藥典2015 年版四部通則0512 色譜法規(guī)定，若需使用小粒徑(約2μm)填充劑，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配;如有必要，色譜條件也應(yīng)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種項下規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。口碑好液相色譜填料哪家專業(yè)多種分離模式的應(yīng)用 　LCCC 法是根據(jù)聚合物的功能基團(tuán)...

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不同選擇性的色譜固定相 　　由于反相色譜分離基于多種作用力的結(jié)果，不同鍵合相或同一種鍵合相但不同的硅膠基質(zhì)、封端技術(shù)和鍵合技術(shù)，其疏水作用、空間位阻、氫鍵作用、靜電作用、π-π作用、偶極-偶極作用等能力不同，對化合物的分離能力不同，故而表現(xiàn)出不一樣的選擇性。比如，在碳鏈中嵌入極性的酰胺基團(tuán)，不僅能夠使鍵合相的水相兼容性增加，而且可以提高化合物與固定相之間的氫鍵作用能力，使之獲得與普通C18 填料不一樣的選擇性。這樣的色譜柱有ZORBAX Bonus RP 和Waters Symmetry shield 等。Huawei Gu等利用Bonus RP 色譜柱與其他常規(guī)碳鏈反相色譜柱選擇性的不同，...