安徽高效液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商

液相色譜類型

液相色譜按其分離機(jī)理，可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法

凝膠色譜法

目前，凝膠色譜法既適用于水溶液的體系，又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí)，稱為凝膠過(guò)濾色譜，凝膠過(guò)濾色譜在生物界的應(yīng)用比較多；采用有機(jī)溶劑為洗脫劑時(shí)，稱為凝膠滲透色譜，凝膠滲透色譜在高分子領(lǐng)域應(yīng)用比較多。

四種不同類型的液相色譜，可以依據(jù)樣品性質(zhì)的不同，選擇不同的方法，靈活應(yīng)用。

高效液相色譜分離原理

液-液分配

(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于高效液相色譜計(jì)算公式：

式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；cm—溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K，K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動(dòng)相對(duì)K影響不大，LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大。

a.正相液-液分配色譜法(Normal Phase liquid Chromatography): 流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。

b.反相液-液分配色譜法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流動(dòng)相的極性大于固定液的極性。

c.液-液分配色譜法的缺點(diǎn)：盡管流動(dòng)相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動(dòng)相中仍有微量溶解；流動(dòng)相通過(guò)色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊力，會(huì)造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相（見(jiàn)后），可克服上述缺點(diǎn)。

什么是液相色譜？

液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過(guò)程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。

經(jīng)典液相色譜的流動(dòng)相是依靠重力緩慢地流過(guò)色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離后的樣品是被分級(jí)收集后再進(jìn)行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復(fù)雜。直到20世紀(jì)60年代．發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高壓輸液泵和自動(dòng)記錄的檢測(cè)器，克服了經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn)，發(fā)展成高效液相色譜，也稱為高壓液相色譜。

賽默飛超高效液相色譜系統(tǒng)Vanquish 系統(tǒng)的設(shè)計(jì)以色譜柱和用戶為中心，幫助用戶得到更好的結(jié)果、更多的結(jié)果、提供更好的交互體驗(yàn)。Vanquish UHPLC 系統(tǒng)是一套整合的、完全生物兼容的系統(tǒng)，滿足色譜工作者對(duì)于UHPLC 的苛刻要求。

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液相色譜類型

液相色譜按其分離機(jī)理，可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法

分配色譜法

這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體，樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離，類似于萃取過(guò)程。

一般常用的固定液有β,β'-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400～4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法，將固定液涂漬在多孔的載體表面，但在使用中固定液易流失。目前，應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中，固定液不是涂在載體表面，而是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。

例如，利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應(yīng)就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不易被流動(dòng)相剝蝕。在分配色譜法中，流動(dòng)相可為純?nèi)軇?，也可以采用混合溶劑進(jìn)行梯度淋洗，其極性應(yīng)與固定液差別大一些，以避免兩者之間相溶。通?？煞譃檎喾峙浜头聪喾峙?。

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