外泌體的產(chǎn)生

外泌體含有的信號(hào)分子能反映分泌細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能狀態(tài),甚至還會(huì)包含細(xì)胞病態(tài)相關(guān)的分子信息,從而提供了豐富的潛在的生物標(biāo)志物分子源。瘤細(xì)胞分泌的外泌體通過(guò)對(duì)大分子物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和傳遞調(diào)節(jié)臨近或遠(yuǎn)處瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境,對(duì)促瘤生成及瘤增生、轉(zhuǎn)移發(fā)揮著不同的調(diào)節(jié)作用。瘤細(xì)胞分泌的外泌體還可以通過(guò)誘導(dǎo)耐藥和免疫抑制來(lái)促進(jìn)瘤的發(fā)展。外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間,這些特點(diǎn)使得外泌體可應(yīng)用于瘤的早期診斷和預(yù)后判斷。靶向瘤的外泌體的標(biāo)志物可能為瘤疾病的診斷和治理提供新的指標(biāo)和途徑,對(duì)高危人群早期診斷和早期治理以降低或減緩瘤病例的發(fā)生上發(fā)揮著重要的作用。以前無(wú)法用超速離心法提取的微囊泡，也通過(guò)運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。外泌體的產(chǎn)生

外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤細(xì)胞的增殖過(guò)程。瘤細(xì)胞通過(guò)與自身微環(huán)境的信息交流促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖，而外泌體（Exosome）可以充當(dāng)這種信息載體。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)基因突變時(shí)，外泌體（Exosome）會(huì)通過(guò)膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細(xì)胞，從而導(dǎo)致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達(dá)，使瘤細(xì)胞獲得增殖特性。瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體（Exosome）還可以通過(guò)直接抑制免疫細(xì)胞，促進(jìn)瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視，為瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)創(chuàng)造條件。然而，雖然當(dāng)前外泌體生物學(xué)仍然不成熟，但越來(lái)越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床轉(zhuǎn)化。湖南外泌體tmt類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體。

已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo)，根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中，從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制，通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制，分析會(huì)引起何種生理作用，這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。甚至活內(nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)（哪個(gè)外泌體遷移至何處）也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。實(shí)際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體，其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較，PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上，幾乎沒(méi)有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復(fù)性好。

目前，在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn)，外泌體通過(guò)分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來(lái)越多地被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外，它們還有潛力被用于臨床，作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會(huì)將含有不同RNA和蛋白質(zhì)成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中，因其特殊性，外泌體可以作為生物標(biāo)志物來(lái)對(duì)疾病進(jìn)行檢測(cè)。例如，從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預(yù)后的指標(biāo)。從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物，可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。

外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí)，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些？lexoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類(lèi)血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA，包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類(lèi)等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果，涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類(lèi)等信息。外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。外泌體的產(chǎn)生

外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。外泌體的產(chǎn)生

目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機(jī)、無(wú)法進(jìn)行多樣品分析等問(wèn)題。因此外泌體研究相對(duì)困難，需要盡快開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細(xì)胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細(xì)胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過(guò)磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過(guò)含有EDTA的洗脫緩沖液進(jìn)行分離，提取高純度的完整外泌體。外泌體的產(chǎn)生